Качественная реакция на ацетон К 1 - 2 мл мочи добавляют 5 - 6 капель 10% раствора NaOH и 3 - 4 капли раствора Люголя. При наличии ацетона начинает выделяться йодоформ, который определяется по характерному запаху (запах похож на запах в стоматологической поликлинике, "больничный" запах).
Реакция Розина на желчные пигменты (качественное определение билирубина) В пробирку наливают 2-3 мл мочи и осторожно наслаивают спиртовой раствор йода. При наличии желчных пигментов на границе мочи и йода образуется зеленое кольцо
Реакция на наличие желчных кислот (проба Гая) В стаканчик наливают 20 мл мочи, затем на ее поверхность просеивают через марлю тонко измельченный порошок серы. Если моча содержит желчные кислоты, сера оседает на дно в течении 5 минут. При отсутствии желчных кислот сера остается на поверхности даже при легком встряхивании стаканчика.
Качественная проба на кровь в моче В пробирку наливают 4-5 мл мочи, добавляют 5-6 капель раствора щелочи (подойдет нашатырный спирт) и кипятят. Образуется хлопьевидный осадок. В присутствии крови или гемоглобина отстоявшийся осадок темнее мочи; при отсутствии кровяного пигмента осадок будет более светлым, чем моча.
Б. Количественное определение белка в моче по методу Брандберга-Стольникова. В другие пять пробирок отмеривают по 2 мл концентрированной нитратной кислоты
"Нитратная кислота" это та, которую обычно азотной называют? То есть имеется в виду ксантопротеиновая реакция?
"Нитратная кислота" это та, которую обычно азотной называют? То есть имеется в виду ксантопротеиновая реакция?
Да, нитратная кислота и азотная - одно и то же вещество.
Ксантопротеиновая реакция - реакция на ароматические аминокислоты, в исследуемый раствор добавляется концентрированная азотная кислота, затем раствор нагревается. При положительном результате раствор окрашивается в желтый цвет. Определение белка по Бранденбергу-Стольникову основано на кислотном осаждении белка.
Зарегистрирован: 30.08.2009 Сообщения: 2843 Откуда: Москва
Я биохимик. В середине прошлого века белок в моче (у людей!) определяли с уксусной кислотой, при этом значений было ровно 4: -, +, ++, и +++. С азотной кислотой нужно работать под вытяжкой. Наслаивание кислоты - метод неоднозначный, наслаиванием более плотных и вязких растворов занималась - это долго, нужен опыт и хорошие пипетки. А тут вязкость - практически вода. До добывания кислоты попробуйте налить в пробирку 2 мл воды, окрашенной акварельными красками, и наслоить на неё чистую воду, задача примерно та же. Поэтому все количественные методы калибруют по веществу, которое определяют. Например, я бы взяла мочу без белка (это любым методом можно показать, хоть бы и с кислотой), добавила нужное количество, например, раствора бычьего сывороточного альбумина и провела тест, замеряя время в своих руках. Пробирки для наслаивания моют до "химичкской чистоты", чтобы капли воды (кистислоты) растекалась по поверхности, а не висели по отдельности. Поэтому мне упомянутый метод определения белка не кажется удачным. Есть разные цветные реакции на белок, некоторые и используются в полосках. Как все это зависит от плотности (и времени регистрации) - вопрос отдельный, но хорошие методы есть и это калибруется. Однако дома спектрофотометра все равно нет. Важно и другое. Недостаточность работы почек показывает появление в моче белков плазмы крови. А вот белок из слущивающихся клеток, клеток крови, бактерий, слизи никакого отношения к фильтрации мочи не имеет. Если сразу к моче добавлять щелочь, то все многообразие растворится и даст вклад в суммарный белок. Поэтому анализ нужно поводить, пока клетки не лопнули при хранении и отделять все включения центрифугированием. Если гемолиз уже прошел и моча красноватая, определение белка даст заведомо странные (завышенные) результаты.
рН в первом приближении определяют полосками, более точно - рН-метром, но рН-метр тоже нужно настроить по тестовым растворам.
Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и гости: 1
Вы не можете начинать темы Вы не можете отвечать на сообщения Вы не можете редактировать свои сообщения Вы не можете удалять свои сообщения Вы не можете добавлять вложения